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綠葉中色素的提取和分離.ppt

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實驗 綠葉中色素的提取和分離提?。壕G葉中的色素溶于____________________而不溶于水, 可用______________提取色素。分離:各種色素在_________中溶解度不同,___________隨 _________在濾紙上擴散得快,反之則慢,從而使各種色素相互分離。有機溶劑無水乙醇無水乙醇層析液溶解度高的層析液1.實驗中幾種化學試劑的作用化學試劑作 用 無水乙醇 _____綠葉中的色素 層析液 _____綠葉中的色素 二氧化硅 增加杵棒與研缽間的摩擦力,破壞細胞結構,使_____充分 碳酸鈣 防止研磨過程中_____被破壞 提取分離研磨色素2.替代材料可用其他綠色葉片代替菠菜葉,但不能用大白菜等含葉綠素較少的材料。3.替代實驗品(1)提取液:提取液除用無水乙醇外,還可用丙酮代替。(2)二氧化硅:用純凈的細河沙代替,使研磨更加迅速充分。(3)碳酸鈣:用碳酸鈉代替碳酸鈣,由于碳酸鈣不溶于水,使濾液有許多泡沫,而碳酸鈉易溶于水,使濾液泡沫大大減少。二氧化硅、碳酸鈣 無水乙醇 一端兩個角 用鉛筆畫線 橙黃色葉黃素葉綠素a葉綠素b黃綠色1.為什么要在濾紙條一端剪去兩角?提示:防止層析液在濾紙條的邊緣擴散過快而形成弧形色素帶。2.試分析分離色素時色素帶顏色過淺的原因。提示:(1)葉片顏色太淺;(2)葉片放置時間太久;(3)研磨不充分;(4)未加CaCO3粉末;(5)加入提取液量太多。3.實驗中的注意事項及操作目的歸納過程注意事項操作目的 提取色素 (1) 選新鮮綠色的葉片 使濾液中色素含量高 (2) 研磨時加無水乙醇溶解色素 (3)加少量SiO2和CaCO3研磨充分和保護葉綠素 (4)迅速、充分研磨防止乙醇揮發,充分溶解色素 (5) 盛放濾液的試管管口加棉塞防止乙醇揮發和色素氧化 過程注意事項操作目的 分離色素(1) 濾紙預先干燥處理使層析液在濾紙上快速擴散(2) 濾液細線要直、細、勻使分離出的色素帶平整不重疊(3)濾液細線干燥后再畫一兩次使分離出的色素帶清晰分明(4)濾液細線不觸及層析液防止色素直接溶解到層析液中【技巧點撥臺】1.從色素帶的寬度可推知色素含量的多少,色素帶越寬,色素含量越多;從色素帶的位置可推知色素在層析液中溶解度大小,色素帶擴散得越遠,溶解度越大。2.在濾紙條上,相鄰兩條色素帶間距離最寬的是胡蘿卜素和葉黃素;相鄰兩條色素帶間距離最窄的是葉綠素a和葉綠素b。 實驗方法:實驗材料的常用處理方法和技術【理論指導】熟悉常用的實驗材料處理方法和技術,理解每種方法和技術的適用情況并熟練掌握其操作技能,可以在設計實驗時進行遷移和利用。常用處理方法主要包括以下幾個方面:方法適用范圍處理方法或原理教材涉及實驗 研磨過濾適用于從生物組織中提取物質,如酶、色素等研磨時要先將生物材料切碎,然后加入摩擦劑(常用二氧化硅)、提取液及其必要物質,充分研磨之后,往往要進行過濾,以除去渣滓,所用過濾器具則根據需要或根據試題中提供的器材加以選用,如可用濾紙、紗布、脫脂棉、尼龍布等綠葉中色素的提取和分離方法適用范圍處理方法或原理教材涉及實驗 紙層析法適用于溶液中物質的分離紙層析法是利用物質隨層析液在濾紙上擴散速度不同的原理,達到將物質分離的目的。主要步驟包括制樣、制備濾紙條、畫濾液細線和層析分離綠葉中色素的提取和分離方法適用范圍處理方法或原理教材涉及實驗 解離技術用于破壞細胞壁,分散植物細胞,制作臨時裝片將洋蔥根尖放入盛有鹽酸和酒精混合液的玻璃皿中室溫下解離觀察根尖分生組織細胞的有絲分裂恒溫技術適用于有酶參與的生化反應一般用水浴或恒溫箱探究溫度對酶活性的影響方法適用范圍處理方法或原理教材涉及實驗 同位素示蹤技術用于物質代謝以及其他實驗中以了解物質來源或去向,或者區分事情結果是由于此還是彼的緣故用同位素標記某種特定元素或化合物光合作用光反應產物——氧氣中氧的來源,二氧化碳形成葡萄糖的途徑,確定什么是遺傳物質的噬菌體侵染細菌的實驗等【典例分析】某同學在做“綠葉中色素的提取和分離”實驗時,在實驗報告中寫的原理是:綠葉中色素的提取——紙層析法;葉綠體中色素的分離——無水乙醇提取法。該同學在做綠葉中色素的提取時,改用下列處理方法:①綠葉放在盛有清水的燒杯中靜置2 h;②綠葉放在盛水的燒杯中,煮沸3 min后取出,放入盛乙醇的燒杯中,隔水加熱;③綠葉放在盛乙醇的燒杯中,隔水加熱;④綠葉放在盛水的燒杯中,煮沸10 min;⑤綠葉放在研缽中研磨,然后放在盛乙醇的燒杯中。請分析該實驗的原理是否正確;改變處理方法后哪些溶液會變綠?!痉治觥?1)綠葉中色素的提取——無水乙醇提取法;綠葉中色素的分離——紙層析法。(2)色素是有機物,在水中不溶解。綠葉中的色素能溶解在乙醇、丙酮等有機溶劑中。當綠葉放在盛水的燒杯中,煮沸后,由于細胞膜和葉綠體膜變成了全透性,葉綠素會擴散進入水中。綠葉放在研缽中研磨時會破壞細胞膜和葉綠體膜,葉綠體色素溶解在乙醇中?!就卣埂?1)若②③④中都變綠,顏色的深淺一樣嗎?提示:不一樣。由于受加熱條件的影響,溶解量不等,所以燒杯中的顏色深淺不同。(2)在檢測綠葉進行光合作用產生淀粉時為什么要將綠葉放在盛乙醇的燒杯中隔水加熱?提示:放在乙醇中是為了脫去色素,避免對實驗現象的干擾。因為淀粉的檢測是利用淀粉與碘反應呈現藍色的原理。隔水加熱是為了受熱均勻和安全。因為酒精易燃。1.(2011·江蘇高考)某研究組獲得了水稻的葉黃素缺失突變體。將其葉片進行了紅光照射光吸收測定和色素層析條帶分析(從上至下),與正常葉片相比,實驗結果是( )A.光吸收差異顯著,色素帶缺第2條B.光吸收差異不顯著,色素帶缺第2條C.光吸收差異顯著,色素帶缺第3條D.光吸收差異不顯著,色素帶缺第3條【解析】選B。因為題干中水稻為葉黃素缺失突變體,對其葉片進行實驗后,色素層析帶一定缺第2條,即葉黃素。但光吸收差異不顯著,因為葉黃素主要吸收藍紫光,紅光被葉綠素a和葉綠素b吸收,故B項符合題意。2.如圖表示某同學做“綠葉中色素的提取和分離”實驗的改進裝置,下列與之有關的敘述中,錯誤的是( )A.應向培養皿中倒入層析液B.應將濾液滴在b處,而不能滴在a處C.實驗結果應是得到四個不同顏色的同心圓D.實驗得到的若干個同心圓中,最大的一個圓呈橙黃色【解析】選B。a處應滴加濾液,加入培養皿中的層析液沿燈芯向上擴散,到達a點后沿圓形濾紙擴散,得到四個不同顏色的同心圓,由內向外依次是葉綠素b、葉綠素a、葉黃素、胡蘿卜素。3.在做“綠葉中色素的提取和分離”實驗時,甲、乙、丙、丁四位同學對相關試劑、藥品的使用情況如下表所示(“+”表示使用,“-”表示未使用),其余操作均正常,他們所得的實驗結果依次應為( )試劑甲乙丙丁無水乙醇-+++水+---CaCO3++-+SiO2+++-A.①②③④ B.②④①③ C.④②③① D.③②①④【解析】選B。本題綜合考查“綠葉中色素的提取和分離”實驗中各種試劑、藥品的作用。無水乙醇用于溶解綠葉中的色素,甲同學未加無水乙醇,其濾紙條上應無色素帶;CaCO3能夠防止研磨時色素被破壞,丙同學未加CaCO3,其濾紙條上的色素帶葉綠素a、葉綠素b應較窄;SiO2能夠使研磨更充分,丁同學未加SiO2,其濾紙條上的四種色素帶均應較窄。乙同學操作正確,其濾紙條上的色素帶應為正常的④分布。4.根據“綠葉中色素的提取和分離”實驗,回答下列問題:(1)甲同學利用新鮮的玉米綠色葉片進行該實驗,在濾紙上出現了四條清晰的色素帶,其中呈黃綠色的色素帶為_______。(2)乙同學在改變層析液組成的情況下進行相同實驗,濾紙條上只出現了黃、綠兩條色素帶。他用刀片裁出帶有色素帶的濾紙條,用乙醚分別溶解條帶上的色素,濃縮后用一分析儀器檢測,通過分析色素溶液的_______來判斷條帶的色素種類。(3)實驗結束幾天后,乙同學發現部分預留葉片已變黃。他認為這是由于葉片中某些色素降解所造成的,丙同學則認為是某些色素含量增加造成的。根據所學知識,設計實驗來判斷哪位同學的觀點是正確的?!窘馕觥勘绢}考查驗證生物學事實、正確分析和處理實驗現象和結果等基本實驗能力,同時考查對生物學問題進行初步探究的能力。(1)甲同學利用新鮮的玉米綠色葉片進行該實驗,在濾紙上出現了四條清晰的色素帶,其中呈黃綠色的色素帶為葉綠素b。(2)可通過分析色素溶液的吸收光譜來判斷條帶的色素種類。(3)可通過色素提取和分離實驗,比較這種葉片和新鮮葉片色素的組成及各種色素的含量后,得出結論。答案:(1)葉綠素b (2)吸收光譜(3)從預留的葉片中挑選出足量的、份量相等、大小相近的已變黃的葉片和新鮮葉片為實驗材料,在相同條件下,再次進行綠葉中色素的提取和分離實驗, 測定和記錄實驗結果,比較這種葉片與新鮮葉片色素的組成及各種色素的含量后,得出結論。
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