惠州地區小型村鎮水源產毒藍藻污染初探.pdf

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農業環境科學學報2012,31(7):1404—1411JournalofAgro—EnvironmentScience惠州地區小型村鎮水源產毒藍藻污染初探袁志勇,,一,朱紅惠:,霍光華卜,馮廣達2,陳遠良2(1.江西農業大學生物科學與工程學院,南昌330045;2.廣東省微生物研究所,廣東省菌種保藏與應用重點實驗室,廣東省微生物應用新技術公共實驗室,廣東省華南應用微生物重點實驗室一省部共建國家重點實驗室培育基地,廣州510070)摘要:為了揭示惠州地區農村小型水源產毒藍藻污染情況,從惠州村鎮采取不同類型水源地的水樣,分別利用分子生物學和HPLC方法分析水樣中的產毒藍藻污染情況和微囊藻毒素含量。通過微囊藻毒素合成基因片段mcyA—Cd的檢測發現,在采取的27個水樣中,12個水樣已經被產毒藍藻污染。PCR—DGGE和克隆測序的結果證明,利用mcyA—Cd基因對環境樣品中的產毒藍藻進行初步檢測具有較高的特異性和準確性,所有樣品中只有一個樣品檢出來自阿氏浮絲藻屬的產毒藍藻,其他檢出的產毒藍藻均為微囊藻屬;HPLC分析結果顯示,8個水樣檢出微囊藻毒素,其中5個樣品超過1Ixg·L-1。研究結果表明,mcyA—Cd基因可以用于快速、準確的對環境樣品中的產毒藍藻進行初步檢測;采樣區域部分水源地已經被產毒藍藻污染,應該采取相應措旋對惠州地區農村水源地進行產毒藍藻的監測,防止或減少微囊藻毒素對人產生的危害。關鍵詞:產毒藍藻;微囊藻毒素;PCR—DGGE;HPLC中圖分類號:X172文獻標志碼:A文章編號:1672—2043(2012)07—1404—08AnalysisofMicrocystin-producingCyanobacterialinSmallRuralSurfaceWaterSamplesfromHuizhou,ChinaYUANZhi—yong”,ZHUHong-hui2,HUOGuang-hua”,FENGGuang-da2,CHENYuan-lian92.(1.CollegeofBiosciencesandEngineering,JiangxiAgriculturalUniversity,Nanchang330045,China;2,GuangdongInstituteofMicrobiology,GuangdongProvincialKeyLaboratoryofMicrobialCuhureCollectionandApplication,GuangdongOpenLaboratoryofAppliedMicrobiology,StateKeyLaboratoryofAppliedMicrobiology(Ministry-GuangdongProvinceJointlyBreedingBase),SouthChina,Guangzhou510070,China)Abstract:Microcystins(MCs)arepotenthepatotoxinsproducedbymicrocystin—producingcyanobacteriaandgiveasignificanthealthhazardtohumanandanimals.MCsarenormallyproducedbymany,butnotallstrainsofthecyanobacteriageneraPlanktothrix,Mcrocystis,Anabae—ha.Toinvestigatethemicrocystin-producingcyanobacteriainruralsurfacewatersamples,differenttypesofruralsurfacewaterweresampledfromHuizhou,includingpoolwater,reservoirwaterandrunningwater.MoleculartechniquesandHPLCwereemployedtodetectthemicro—cystin~producingcyanobacteriaandMCs.TheresultsshowedthatmcyA-Cd,thespecificfragmentcodingforthemicrocystinsynthetasecomplex,wasdetectedin12outof27samples.PCR—DGGEincombinationwithcloningandsequencingprovedthattheprimarydetectionofmicroeystin-produeingcyanobacteriaintheenvironmentalsampleusingmeyA—Cdwasofhighspecificityandaccuracy.HPLCanalysisindi—catedthatMC-RRorMC-LRwasdetectedin8samples,andexceeded1I,tg·L—in5samplesoutofthem.TheseresultssuggestthatmcyA-Cdcouldbeappliedtotherapidandaccuratedetectionofmicrocystin-producingeyanobacteriainenvironmentalsamples,andthatthewaterresourcesofthesamplingsiteshadbeencontaminatedbymicrocystin-producingcyanobacteria.Appropriatemeasuresshouldbetakentomonitorthemicrocystin-producingeyanobaeteriaintheruralsurfacewaterinHuizhou,inordertoavoidorreducethepotentialhazardstohuman.Keywords:microcystin—producingcyanobacteria;mierocystins;PCR-DGGE;HPLC收稿日期:2012—0l—15基金項目:國家科技重大專項“水體污染控制與治理”資助項目(2008ZX07425—002)作者簡介:袁志勇(1986一),男,江西吉安人,碩士研究生,主要從事環境微生物研究。E-mail:[email protected].toni+通訊作者:霍光華E—mail:[email protected].corn
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