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溶菌酶作用機理.doc

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?溶菌酶作用機理1.溶菌酶:是催化某些細菌細胞壁水解、從而溶解其細胞壁的酶,主要存在于雞蛋清及動物的眼淚中。2.細胞壁多糖:是N-乙酰氨基葡萄糖(NGA)-N-乙酰氨基葡萄糖乳酸(NAM)的共聚物,其中的NGA及NAM通過b-1,4糖苷鍵而交替排列:3.溶菌酶的結構:由129個氨基酸組成的單肽鏈蛋白質,含有四對二硫鍵,一級結構如圖所示4.溶菌酶的催化作用:為葡糖苷酶,能水解NAM的C1與NAG的C4之間的糖苷鍵,但不能水解NAG的C1 與NAM的C4之間的糖苷鍵,水解作用如下:5.溶菌酶的三維結構:溶菌酶分子內部幾乎是非極性的,在分子的表面有一個較深的裂縫,恰好能容納多糖底物的六個單糖(ABCDEF環),是溶菌酶的活性部位,其中白色所示的是活性部位的Glu35和Asp52。6.溶菌酶與底物的復合物的三維結構:7.溶菌酶-底物結合部位示意圖:NAG多聚體水解速率表明從5到6聚體增加到最大,活性部位的裂縫正好被六個糖殘基所裝滿,水解部位是D和E之間的糖苷鍵8.溶菌酶與底物的復合物的三維結構示意圖:第四個糖殘基D環由于空間的原因必須由正常的椅式變形為能量較高的半椅式,因此降低了糖苷鍵的穩定性容易斷裂。9.溶菌酶催化作用機制要點總結:(1)Glu35的-COOH提供一個H+到D環與E環間的糖苷鍵O原子上。H+的轉移使D環的C1鍵與糖苷鍵O原子間的鍵斷開,并形成正碳離子過渡中間產物。(2)含有E及F殘基的NAG二聚體離開酶分子。(3)正碳離子中間產物進一步與來自溶劑的OH-發生反應, Glu35質子化,酶游離出來。
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