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實驗室常用血液抗凝劑的特點及應用

'實驗室常用血液抗凝劑的特點及應用'
?實驗室常用血液抗凝劑的特點及應用在實驗室檢驗中,有許多檢測項目的血液標本是需要抗凝才可以檢測的。而抗凝劑種類較多,實際應用中要根據不同的需要進行選擇,才能獲得理想的效果。實驗室中常用的抗凝劑有肝素、乙二胺四乙酸鹽(EDTA鹽)、枸櫞酸鹽、草酸鹽等4種,現將它們的特點及應用分別敘述如下:一、肝素 抗凝是用于血液化學成分檢測的首選抗凝劑。肝素是一種含有硫酸基團的粘多糖,是分散相物質平均分子質量為15000。其抗凝原理主要是通過與抗凝血酶Ⅲ結合引起抗凝血酶Ⅲ構型發生變化,加速凝血酶-凝血酶復合體形成而產生抗凝作用。此外,肝素還能借助血漿輔助因子(肝素輔助因子Ⅱ)來抑制凝血酶。常用肝素抗凝劑是肝素的鈉、鉀、鋰、銨鹽,其中以肝素鋰最好,但其價格較貴,鈉、鉀鹽會增加血液中的鈉、鉀含量,銨鹽會增加尿素氮的含量。通常用肝素抗凝的劑量為10.0~12.5 IU/ml血液。肝素對血液成分干擾較少,不影響紅細胞體積,不引起溶血,適用于做紅細胞滲透性試驗、血氣、血漿滲透量、紅細胞壓積及普通生化測定。但肝素具有抗凝血酶作用,不適合做血凝試驗。另外,肝素過量可引起白細胞聚集和血小板減少,所以不適合做白細胞分類和血小板計數,更不能用于止血檢驗。此外,肝素抗凝血不能用于制作血涂片,因為Wright染色后出現深藍色背景,影響顯微鏡減產。肝素抗凝血應于短時間內使用,否則放置過久血液又可凝固。 二、乙二胺四乙酸鹽(EDTA鹽) EDTA能與血液中Ca2+結合成螯合物,凝血過程被阻斷,血液不能發生凝固。EDTA鹽有鉀、鈉、鋰鹽,國際血液學標準化委員會推薦使用的是EDTA-K2,其溶解度最高,抗凝速度最快。EDTA鹽通常配成質量分數是15%的水溶液,每ml血液加1.2mgEDTA,即每5ml血液加0.04ml 15%EDTA溶液。EDTA鹽可在100℃下干燥,抗凝作用不變。 此抗凝劑不影響白細胞計數及大小,對紅細胞形態影響最小,并且可以抑制血小板的聚集,適用于一般血液學檢測。但如果抗凝劑濃度過高,滲透壓上升,會造成細胞皺縮。EDTA溶液pH與鹽類關系較大,低pH可使細胞膨脹。EDTA-K2可使紅細胞體積輕度膨脹,采血后短時間內平均血小板體積非常不穩定半小時后趨于穩定。EDTA-K2使 Ca2+、Mg2+下降,同時使肌酸激酶、堿性磷酸酶降低,EDTA-K2的最佳濃度為1.5mg/ml血液,如果血少,中性粒細胞會腫脹分葉消失,血小板會腫脹、崩解,產生正常血小板的碎片,使分析結果產生錯誤。EDTA由于能抑制或干涉纖維蛋白凝塊形成時纖維蛋白單體的聚合,不適于血凝和血小板功能檢測,也不適用于鈣、鉀、鈉及含氮物質的測定。此外,EDTA能影響某些酶的活性和抑制紅斑狼瘡因子,故不適合制作組化染色和檢查紅斑狼瘡細胞的血涂片。三、枸櫞酸鹽 枸櫞酸鹽主要是枸櫞酸鈉,其抗凝原理是能與血液中的Ca2+結合形成螯合物,使Ca2+失去凝血功能,凝血過程被阻斷,從而阻止血液凝固。枸櫞酸鈉有Na3C6H5O7·2H2O和2Na3C6H5O7·11H2O兩種晶體,通常用前者配成3.8%或3.2%的水溶液,與血液按照1:9體積混合。 大部分凝血試驗都可用枸櫞酸鈉抗凝,它有助于Ⅴ因子和Ⅷ因子的穩定,并且對平均血小板體積及其他凝血因子影響較小,可用于血小板功能分析。枸櫞酸鈉細胞毒性較小,也是輸血中血液保養液的成分之一。但是,枸櫞酸鈉6mg才能抗凝1ml血液,堿性強,不適用于血液化驗和生化測驗。四、草酸鹽 草酸鹽也是常用的抗凝劑,優點是溶解度大,作用原理是溶解后解離的草酸根與標本中的Ca2+形成草酸鈣沉淀,使Ca2+失去凝血功能,凝血過程被阻斷。常用的草酸鹽抗凝劑種類有草酸鈉、草酸鉀和草酸銨,草酸鈉的常用濃度為0.1 mol/L,與血液按1:9比例使用。但是,高濃度k+或Na+易使血細胞脫水皺縮,而草酸銨則可使血細胞膨脹,故測定血細胞比容時用草酸銨與草酸鉀或草酸鈉兩者適當比例混合的抗凝劑,恰好不影響紅細胞的形態和體積。常用于血液生化測定,但不適用于K+、Ca 2+的測定。由于生成草酸鈣沉淀,紅細胞會出現鋸齒狀,白細胞出現空泡,淋巴細胞及單核細胞會變形,不宜做血片檢查。草酸鹽可使血小板聚集,并影響白細胞形態,不能用于白細胞和血小板分類計數。主要參考文獻:1.徐叔云,卞如濂,陳 修.藥理實驗方法學[M].第三版.北京:人民衛生出版社,2002:1243.2.郭 建,孫葵英,孫 濱,等.抗凝劑選擇對全血細胞分析的影響.臨床檢驗雜志,1998,16(2):311.3.張 文.臨床檢驗抗凝劑特點及應用.廣東醫學,2005,26(8):1158-1159.4.周偉青.抗凝劑在臨床檢驗中的應用.現代中西醫結合雜志,2006,15(2 4):3403-3404.5.羅學志,喻志祥.淺談抗凝劑在實驗室中的應用.社區醫學雜志,2006,4(8):61-62.
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